Entwicklung neuer Methoden zum Nachweis von Myositiden

Language
de
Document Type
Doctoral Thesis
Issue Date
2005-11-16
Issue Year
2005
Authors
Schulte-Pelkum, Johannes
Editor
Abstract

In this work the marker autoantigens for Polymyositis and Dermatomyositis were generated recombinantly using the baculovirus expression system. A new Line immuno assay in strip design was established that facilitates a differential serological diagnosis of PM/DM in a short period of time. The diagnostic testkits developed at IMTEC Immundiagnostika GmbH in Berlin are now commercially available named ”Myositis-LIA”, ”Jo-1 ELISA” and “PM-Scl ELISA”. The main targets of this work were: -Amplification of the genomic Sequences of Jo-1, Mi2, PM-Scl, SRP54, Ku70, Ku80, RNP- A,-C, and -68kD -Expression of the recombinant Antigens in different Expressionsystems -Purification and immunological characterisation of the recombinant antigens -Development of Testsystems -Evaluation of testsystems using patient sera with known clinical picture

Abstract

In dieser Arbeit wurden Markerautoantigene der Polymyositis bzw. Dermatomyositis (PM/DM) rekombinant mittels eines hochwertigen Expressionsystems hergestellt. Es wurden Testsysteme entwickelt, mit denen ohne großen technischen Aufwand in möglichst kurzer Zeit ein differenzierter serologischer Nachweis einer PM/DM in einem einem Patientenserum erstellt werden kann. Diese bei der IMTEC Immundiagnostika GmbH in Zusammenarbeit mit der Charite Berlin entwickelten Diagnostika sind nunmehr unter den Bezeichnungen „Myositis LIA“, „Jo-1 ELISA“ und „PM-Scl ELISA“ im Handel. Im Rahmen dieser Arbeit wurden folgende Schwerpunkte der Entwicklung durchgeführt: -Amplifikation der rekombinanten Gensequenzen -Expression der rekombinanten Antigene in unterschiedlichen Expressionssystemen -Aufreinigung und immunologische Charakterisierung der rekombinanten Antigene -Entwicklung der Testsysteme -Evaluierung mit klinisch beschriebenen Seren zur Überprüfung der Sensitivität und der Spezifität der entwickelten Testsysteme

DOI
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